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효소 실험: 탈수소효소. 화학 실험

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동물 조직의 효소를 실험해 봅시다. 새로운 연구의 목적은 동물의 조직 호흡 과정에 관여하는 탈수소효소입니다. 이 효소의 이름에서 물질에서 수소 원자를 제거한다는 것이 분명합니다. 어떻게 이런 일이 발생하는지 조금 나중에 볼 수 있지만 지금은 경험에 필요한 모든 것을 준비하십시오.

이번에는 다음 물질이 필요합니다. 5% 포름알데히드 수용액 0,5ml(약학 포르말린을 물로 0,02회 희석); 동량의 10% 메틸렌 블루 수용액(청색 잉크를 희석하여 사용할 수 있음); 기포 방출이 멈출 때까지 베이킹 소다로 조심스럽게 중화시킨 같은 양의 숙신산 수용액; 바셀린 또는 식물성 기름 XNUMXml. 또한 온도계와 연구 대상(신선한 우유, 닭고기 또는 토끼 고기)이 필요합니다.

먼저, 신선한 우유 탈수소효소가 포름알데히드를 어떻게 산화시키는지 봅시다. 이것이 눈에 띄기 위해서는 메틸렌 블루 염료 용액이 필요했습니다. 탈수소 효소는 포름 알데히드에서 수소 원자를 제거하고 쉽게 복구 가능한 염료로 옮기면 변색됩니다. 그리고 이 경우 포름알데히드는 포름산으로 산화됩니다. 환원 후 변색된 염료는 대기 중의 산소에 의해 쉽게 산화되어 다시 청색으로 변한다. 따라서 반응 혼합물은 오일 층으로 공기로부터 격리되어야 합니다.

1번 관. 신선한 생우유 2ml를 시험관 5과 3에 붓고 같은 양의 차가운 삶은 우유를 시험관 XNUMX에 붓는다.

수조의 물을 37°C로 가열합니다. 0,5ml(약 50방울)의 포름알데히드 용액과 5방울의 메틸렌 블루 용액을 1개의 튜브 모두에 ​​추가합니다. 혼합물이 파란색으로 변합니다. 각 바이알에 약간의 오일을 부어 표면에 얇은 절연층을 형성하고 튜브 3과 2을 수조에 넣습니다. 튜브 XNUMX를 실온에 둡니다. 반응 시작 시간을 기록하고 용액의 색상 변화를 관찰합니다. 노트에 결과를 기록하는 것을 잊지 마십시오.

이전과 마찬가지로 주요 질문을 할 것입니다. 용액이 가장 빨리 탈색되는 온도는?

효소는 삶은 우유에서 활성을 유지합니까?

탈색된 용액에 공기를 불어넣으면 어떻게 됩니까?

결론의 정확성을 확인하기 전에 탈수소효소로 다른 실험을 설정한 다음 두 실험의 결과를 고려하십시오.

동물의 근육에는 특정 효소인 숙신산 탈수소효소가 들어 있습니다. 이것은 제거된 수소를 적절한 물질, 예를 들어 메틸렌오스 블루로 전달하여 석신산에서 푸마르산으로의 전환을 촉매합니다. 이 반응은 그들이 말하는 것처럼 혐기성 조건에서 산소의 참여 없이 진행됩니다.

생 닭고기 또는 토끼 고기 (약 10g)를 잘게 자르고 접시에 문지릅니다. 누룩은 거즈에 물을 묻혀 여러 번 헹구어 용해성 물질을 제거한다. 씻은 죽을 4 배의 물과 함께 저어주고 식탁 용 소금이 첨가됩니다-약 5/6 티스푼. 희석된 슬러리를 시험관 5, 4, 4 - 5 ml 각각에 붓습니다. 튜브 0,5를 끓는 수조에 10분 동안 담그고 실온으로 식힙니다. 다음에 숙신산용액 6ml와 메틸렌블루용액 0,5방울을 10, XNUMX번 시험관에 넣고 XNUMX번 시험관에 물 XNUMXml와 염료 XNUMX방울을 넣는다. 공기로부터 혼합물을 격리하기 위해 각 병에 약간의 오일을 추가합니다. 색상 변화를 추적한 후 다음 질문에 답하십시오.

삶은 고기 슬러리가 있으면 염료가 복원됩니까?

이 반응에 숙신산이 필요합니까?

조직에서 온 효소의 거동은 고온에서 유사합니까?

그리고 지금 - 설명. 신선한 우유의 탈수소효소는 포름알데히드 산화 반응을 가속화합니다(이는 메틸렌 블루의 변색에서 나타남). 청색은 환원염료를 대기 중의 산소로 산화시켜 환원염료로 복원할 수 있다. 저온에서 우유 탈수소효소는 천천히 "작동"합니다. 우유를 끓인 후에는 완전히 활동을 잃습니다. 이것은 이 효소도 최적의 반응 온도를 가지고 있다는 것을 의미합니다.

근육 슬러리 실험에서 숙신산 탈수소효소는 모든 효소와 마찬가지로 끓인 후에 활성을 잃습니다. 숙신산이 없으면 반응도 진행되지 않습니다(슬러리를 물로 잘 씻어서 포함된 숙신산을 제거한 경우). 효소는 숙신산을 푸마르산으로 빠르게 산화시켜 수소 원자를 염료로 전달합니다.

그리고 동일한 효소로 한 번 더 실험하지만 미생물로 다른 개체를 사용합니다. 지금까지 동식물 조직을 다루었습니다. 그러나 미생물은 아마도 효소로 훨씬 더 잘 무장되어 있을 것입니다. 결국 미생물은 생화학적인 것 외에는 생존을 위해 싸우는 다른 수단이 없습니다. 미생물 중 하나 또는 오히려 곰팡이로 실험을 설정합니다. 우리는 일반 빵 효모에 대해 이야기하고 있습니다. 효모에 의해 생성되는 많은 활성 효소 중에는 친숙한 탈수소효소가 있습니다.

끓인 물 XNUMX 티스푼과 함께 접시에 압착 효모 조각을 문지릅니다. 플라스틱 또는 알루미늄 스푼으로 더 잘 갈아줍니다. 혼합물이 균질해지면 깨끗한 피펫으로 두 개의 시험관에 넣습니다. 먼저 막대기에 면봉으로 비누로 씻고 물로 헹구고 말려야합니다. 다른 피펫으로 두 테스트 튜브에 약간의 오일을 추가합니다.

시험관 1을 끓는 물이 담긴 냄비에 10분 동안 넣고 실온으로 식힙니다. 두 시험관에 알갱이 설탕 한 꼬집을 넣고 부드럽게 흔들어 설탕을 녹입니다. 세 번째 피펫으로 염료 용액 15-XNUMX방울을 두 시험관에 주입합니다. 용액의 색깔을 관찰하십시오.

실험은 다소 복잡할 수 있습니다. 이를 위해서는 더 많은 테스트 튜브가 필요합니다. 다양한 양의 효모와 과립 설탕을 섭취하여 용액의 온도를 변경하십시오. 그리고 유도 질문 없이 스스로 결론을 내리도록 남겨둡니다. 이제 충분한 경험을 쌓았으니 충분히 할 수 있습니다.

저자: Olgin O.M.

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