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효소 실험: 아밀라아제. 화학 실험

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효소는 많은 화학 반응의 속도를 높이지만 선택적으로 그렇게 합니다. 그들 각각은 자신의 좁은 "전문 분야"를 가지고 있으며 동일한 과정이 때때로 여러 효소에 의해 가속화됩니다. 이것이 우리가 지금 확인할 것입니다.

"조각"에 물 분자를 추가하여 전분을 파괴하는 효소를 고려해 봅시다. 가수 분해 효소. 그중에는 "장에서 이미 이야기 한 아밀라아제가 있습니다.탄수화물 실험". 이러한 효소 작용의 본질을 이미 알고 있으므로 즉시 비교 실험에 참여할 것입니다. 인간과 동물의 아밀라아제가 전분에 어떻게 작용하는지 확인할 것입니다.

이전과 마찬가지로 인간 아밀라아제의 출처는 타액입니다. 동물 기원의 아밀라아제는 벌꿀에서 찾을 수 있습니다.

먼저 다섯 가지 솔루션을 준비하십시오. 첫 번째 용액: 시험관에 약 0,5ml의 타액을 수집하고 차가운 끓인 물로 XNUMX배 희석합니다. 두 번째 솔루션: 매우 액체인 전분 페이스트(물 한 잔에 XNUMX/XNUMX 티스푼의 전분). 세 번째 솔루션 : 물로 XNUMX 배 희석 된 약국 요오드 팅크. 네 번째 용액: 벌꿀 XNUMX~XNUMX방울을 물로 XNUMX배 희석하여 완전히 섞습니다. 다섯 번째 솔루션: 물 XNUMX테이블스푼에 베이킹 소다 반 티스푼.

이번에는 5개의 시험관이 필요합니다. 모든 시험관에 약 1ml의 페이스트를 붓습니다. 튜브 4, 7, 5에는 피펫으로 식초 2방울을 넣고 튜브 5, 8, 5에는 같은 양의 소다 용액을 넣습니다. 나머지 튜브에 순수한 물 10방울을 추가합니다. 모든 시험관의 내용물을 섞고 각 시험관에 묽은 타액 XNUMX방울을 넣는다.

10분 후 시험관 1, 2, 3에 요오드 용액 한두 방울을 넣고 섞는다. 색상 변화를 관찰하십시오. 다시 15분 후 같은 양의 요오드를 튜브 4, 5, 6에 추가하고 다시 10분 후에 나머지 튜브에 추가합니다. 전분과 덱스트린은 여러분이 기억하는 것처럼 난로와 다른 색을 내고 아밀라아제가 전분을 분해하면서 색이 바뀝니다. 따라서 전분의 분해뿐만 아니라 어떤 환경(산성, 중성 또는 알칼리성)이 이 과정에 더 유리한지 판단할 수 있습니다.

벌꿀에 대한 실험은 정확히 같은 방식으로 설정됩니다. 다른 샘플에서 아밀라아제의 활성은 크게 변동될 수 있으므로 가수분해 시간을 줄이거나 늘려야 할 수 있습니다. 예를 들어, 담배를 많이 피우는 사람의 침에는 아밀라아제가 거의 없습니다.

다음 실험을 위해서는 보리 맥아 - 발아 보리 알갱이가 필요합니다. 곡물을 몇 시간 동안 물에 담그고 매일 약간의 물을 추가하여 4-5 일 동안 접시에 발아시킵니다. 콩나물을 분리하여 물로 헹구고 나무 유봉이나 숟가락으로 잘 문지릅니다. 죽을 두 배의 증류수로 희석하고 촘촘한 천을 통해 유리에 짜냅니다. 이 추출물에는 두 가지 효소인 알파-아밀라아제와 베타-아밀라아제가 포함되어 있습니다. 추가 처리를 통해 다른 하나의 동작을 관찰하기 위해 하나를 파괴할 수 있습니다. 알파아밀라아제는 열을 가하면 파괴됩니다. 보리 추출물 한 부분에 물 세 부분을 넣고 혼합물을 저은 다음 수조에서 20 70C로 0분간 가열하면서 완전히 저어줍니다. 냉각된 용액에는 베타-아밀라아제가 포함되어 있습니다.

이제 알파-아밀라아제 용액을 얻으려면 산으로 베타-아밀라아제를 파괴해야 합니다. 추출물 약 5ml를 냉장고 또는 얼음에서 2-3 ° C로 식히고 불완전한 식힌 식초 티스푼을 추가하고 시험관에 거의 꼭대기까지 찬물을 추가합니다. 혼합물을 혼합하고 15-20분 동안 그대로 둔 다음 거품이 멈출 때까지 초크 가루를 추가하여 용액을 중화합니다. 혼합물을 다시 저어주고 물로 두 번 희석하고 서서 침전물 위의 액체를 깨끗한 시험관으로 배출하십시오. 이것으로 실험 준비가 완료되었습니다.

XNUMX개의 시험관에 붓는다 전분 용액 1ml와 물 9ml. 피펫으로 알파-아밀라아제 용액 1방울을 테스트 튜브 5-3에 추가하고 동일한 양의 베타-아밀라아제 용액을 나머지 테스트 튜브에 추가하고 모든 테스트 튜브의 내용물을 혼합합니다. 1분 후 시험관 6과 2에 요오드 용액 한 방울을 넣고 저어준다. 시험관 7와 5은 3분 후, 8과 10은 4분 후, 9와 20는 5분 후, 10와 30은 XNUMX분 후에 동일한 작업을 수행합니다.

알파-아밀라아제가 있으면 색상이 빠르게 변합니다. 청자색-분홍색-노란색: 이 경우 덱스트린이 형성됩니다-전분 분자 조각. 베타-아밀라아제는 다르게 작용합니다. 전분 분자에서 "물린"조각이므로 요오드가 포함 된 색상은 파란색으로 유지되지만 전분이 분해되면 밝기가 감소합니다.

이 실험의 결과는 유사한 효소라도 특성의 다양성을 명확하게 보여줍니다. 살아있는 유기체에서 효소는 일반적으로 함께 작용합니다. 일어나는 변형은 시험관에서 관찰되는 비교적 단순한 반응보다 훨씬 더 복잡합니다. 그러나 단순한 것에 대한 지식은 복합적인 지식에 이르는 첫 걸음입니다.

저자: Olgin O.M.

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